組培室汙染了怎麽辦?
添加時間:2014-04-21    閱讀次數:4223

現在許多科研單位和花木生產企業都已配置了組織培養室。組培技術已成為重要的生物技術之一。然而有的組培室組培苗的數量和質量卻一直沒有質的飛躍,究其原因,最主要的因素就是汙染所造成的。被汙染後首先是生產成本的提高;其二,對植株造成傷害;其三,增加接種源受汙染的機率。易博国际組培特整理此篇內容分享給大家,希望對有這方麵困惑的朋友有幫助!

組培室常見汙染源

組織培養過程中的汙染源主要有以下幾種:

(1)戶外風大,菌類進屋機會多。有風就有沙,有沙就有塵,有塵就有菌,菌塵共存,這是菌類進屋的主要原因之一。

(2)屋內太潮,菌類繁衍多。需保持室內空氣幹燥,如使用空調“除濕”功能,也可減少真菌生長繁殖。

(3)人員帶菌多。在整個操作室內,人員可說是最大的帶菌者,不管在毛發或是衣服等地方,都隱藏著數不清的菌類。在進入操作室前,最好能對作業人員進行清潔處理,比如換上幹淨的白大褂,換上實驗室的鞋,衣服鞋每星期洗一次,上超淨台前手要用肥皂清洗兩遍,接種前手再用酒精擦拭一遍。

(4)屋內不幹淨。紫外線能殺滅或抑製真菌生長,因此應在每次接種前進行20分鍾的紫外燈消毒。

(5)清理屋內帶菌組培苗。在植物病害中,真菌所引起的病害尤其嚴重,且因會產生孢子,隨著空氣飄散。一旦落入適當的環境下,一粒小小的孢子便會擴大成一個菌落,汙染整個組織培養瓶。因此一旦有真菌汙染的組培苗,就要用高壓滅菌器徹底消滅,以防擴散。(6)接種不正確。不正確操作也會增加汙染機率,如開蓋太快,滅菌不夠,操作過慢等。接種過程應該輕開蓋,快操作。

組培室汙染原因

若汙染菌類是零星分散在培養基中,則可確定是人為引起的汙染,比如培養基滅菌不徹底;超淨工作台長時間不換濾網,致使淨化能力降低;接種用具滅菌不徹底;操作不正確,動作生硬緩慢,開瓶時間太久,接種台擺放物品雜亂,操作中心在人體範圍之內;接種室長期不滅菌,菌類太多等。

若汙染菌類是從材料周圍長起,則可證明是植物材料帶菌引起可能是接種用具滅菌不徹底,接種時材料被汙染;或者是未及時發現汙染苗,接種過程交叉感染等。

若菌類從材料培養基以上部分長起,而不是從培養基先長起,且發生在5天以後,則說明是材料帶的內生菌。若從培養基以下開始長菌,發生時間較早,且有從裏向外的趨勢,則說明是切口引起的汙染,原因可能是滅完菌後,未剪去兩個切口或雖剪但器具帶菌。

汙染苗如何搶救?

真菌汙染後,如果已形成孢子,則必須經高壓滅菌後扔掉,即使僅形成菌絲也應處理後扔掉,因為菌絲能夠達到材料內部,因此,真菌汙染是滅絕性的。

細菌汙染後由於細菌繁殖是靠芽孢,細菌不會彌散在整個空間,因此隻要及時發現,可將材料上部未感菌的部分剪下轉接,材料仍可以用。

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